真没想到（流式方法：实体组织分散为单个细胞的方法）
实体组织分散为单个细胞，必须改变或移除细胞内的黏着物质。不同细胞有不同的黏着物质。这些黏着物质的生化性质决定了某种组织系统最适宜的分散方法。例如弹性纤维不能被胰酶消化。所以分散富含弹性纤维的心脏血管组织，使用弹性蛋白酶更有效。另外，所有组织间都有蛋白和糖蛋白，所以利用蛋白水解酶是最常用的酶分散方法。到目前为止，实体组织分散成单个细胞的方法基本上分为四种：机械法、酶处理法、化学试剂处理法和表面活性剂处理法， 机械法
机械法分散实体组织包括：用剪刀剪碎或者用锋利的解剖刀剁碎组织，用匀浆器匀浆，用细注射针头抽吸细胞或细胞器的悬液以分散细胞；用尼龙网或者不锈钢网过滤等。单纯机械法也可分散组织，但细胞成活率低，细胞悬液中的细胞碎片和细胞丛结的量不稳定等。机械法常与其他方法混合使用
酶处理法
酶消化法是实体组织分散为单个细胞的主要方法。
胰酶 能水解酯键和肽键，包括精氨酸和赖氨酸的羰基。
胶原酶 能降解几种类型的胶原
溶菌酶 能水解糖蛋白和和肽的糖苷键
木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、链霉蛋白酶和中性蛋白酶等几乎能释放所有组织中的细胞
DNA酶能水解DNA和蛋白的复合物，使用它可以减少细胞间的黏连。
弹性蛋白酶能消化连接组织的糖蛋白和弹性蛋白的纤维，可以离解血管、心脏和肝脏组织
透明质酸酶能降解透明质酸，常与其他酶结合使用。
由于不同酶对细胞内和细胞间不同组分有特异的作用，所以可以根据分散什么类型的组织确定使用哪种酶。例如，胶原酶对于富含胶原组织的解聚是最有效的，而解聚其他类型的瘤组织，例如淋巴瘤、一些肉瘤等组织就不必用胶原酶。由于人们对于实体瘤组织细胞间的成分了解不多，实际上常常使用几种酶的组合分散实体组织以提高细胞产额。
各种酶的分散程度都有一定的限制性。特别是在免疫标记实验时，酶处理可能改变细胞膜的成分，从而影响细胞亚群的区分。例如，胰酶作用于细胞后，细胞会释放唾液酸和特异的细胞表面蛋白，而这种作用随着时间的延长又是可逆的。另外，用酶处理时，为了使细胞充分地分散，细胞产额有时会有明显地降低。
化学试剂处理法
化学试剂EDTA和EGTA在不同程度上能结合二价钙离子、镁离子，所以也称它们为二价离子螯合剂。二价钙离子、镁离子能维持细胞表面的完整和维持细胞间基质结构的作用。因此，使用EDTA和EGTA有助于分散实体组织。
四苯基硼能与钾结合，而钾也被认为参与细胞间的接触，四苯基硼能可用于解离肝组织，小肠隐窝细胞和哺乳类实体瘤。
枸橼酸钠也能结合阳离子，二糖的高渗溶液（如蔗糖、麦芽糖、乳糖和纤维二糖等）能切割开细胞间的间隙连接。如果实体组织用酶消化后能保留些细胞丛结，二糖的存在能够解聚它们。
一般看来，用化学试剂处理组织导致细胞成活率低，细胞产额较低，细胞碎片和细胞丛结的量不稳定。最好化学试剂和其他方法联合使用。
细胞表面活性剂处理法
用细胞表面活性剂（也称去污剂）处理实体组织，可引起细胞膜溶解，产生细胞核悬浮液。例如去污剂Nonider P40和Triton X-100都用于制备核悬液。加入适量去污剂也有助于实体组织的分散
上述方法虽然可以单独使用，但是多数情况下是综合使用，如下表。
| 组织系统 | 分散方法 |
| 瘤（小鼠/大鼠） | 胰酶 机械法/胶原酶/弹性蛋白酶 机械法/ 胰酶 机械法/胃蛋白酶 胶原酶/链霉蛋白酶/DNA酶 胶原酶/透明质酸酶/DNA酶 胶原酶/胰酶/EDTA 去垢剂/胰酶 机械法 四苯基硼 中性蛋白酶 机械法/胶原酶 |
| 小肠 | 枸橼酸钠/机械法/EDTA 链霉蛋白酶/胶原酶 EDTA/二硫苏糖醇 机械法 |
| 胃黏膜细胞 | 胶原酶/链霉蛋白酶/EDTA |
| 肺（II型细胞） | DNA酶/胰酶 弹性蛋白酶/胰酶 胰酶/胰凝乳蛋白酶/弹性蛋白酶 |
| 心脏 | 弹性蛋白酶 |
| 肌肉 | 木瓜蛋白酶 |
| 表皮 | 胰酶/二硫苏糖醇 机械法/胰酶 |
| 肝 | 胶原酶/透明质酸酶 溶菌酶 四苯基硼 |
| 肾 | 机械法 胰酶/胶原酶/DNA酶/EDTA |
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